沉降菌和浮游菌监测作为日常生产中微生物监测的两种方法得到了广泛的应用。 他们之间有什么区别？ 让我们一起理解！

1

法规要求

　　GMP对于中国制药企业行业内测试分析方法我们需要进行参照ISO的测试研究方法，而ISO 14698-1微生物污染风险控制管理法规提到微生物监测系统需要根据评估收集工作效率（Collection efficiency ），高收集效率的采样方法和采样设备公司可以自己得到发展更有代表性的数据。对于学生生物负载环境低的环境，如A、B级环境，应当提供更多的采用积极主动采样的浮游菌采样器，而不是一个被动采样的沉降菌方法。

ISO14698-1附录为微生物取样器的收集效率评估提供了指导。

　　现行的2003版的ISO14698对于学生收集工作效率可以分为物理信息收集管理效率和生物技术收集效率，其中一个物理收集效率更在意的是采样分析方法以及是否有能力收集到空气的携菌粒子，而生物进行收集效率更在意的是采样器或者采样方法研究是否能在收集到的同时为了保证该携菌粒子的存活率。

根据上述两种收集效率提供核实文件是制造商的义务和责任。如果制造商无法提供，制药公司将需要制定方法，以核实其使用的收集效率。一般认为，上述两种收集效率达到一定的灵敏度以上即可使用。浮游菌采样器

2

沉降菌的采样效率

　　解决了上述研究微生物采样器的采样工作效率分析验证，我们又回到了一个沉降菌的采样技术效率以及评估。这是行业内的痛点，因为对于我们都知道沉降菌的采样处理方法就是属于一种被动采样教学方式，回收率相当低，无法及时进行管理方法可以验证。基于地心引力的被动采样操作方式，能够不断得到12微米粒径的活性粒子沉降到9cm的采样平皿上的收集利用效率为0.106 CFU/h，沉降到14cm的采样平皿上的收集使用效率为0.256CFU/h。

在9cm取样板上沉积1微米粒径活性颗粒的收集效率为0.008CFU/h。 最大浓度限制为A区CFU/m3，1因此，9厘米的板需要暴露在A级区域取样1250小时（相当于52天），能够在低生物污染负荷环境(CFU)中检测有意义的数据)。

　　科学家研究得到以下结论：沉降菌“是一种太不灵敏的采样分析方法”，以及“沉降菌更好的反映了携菌粒子的沉积作用效果，仅在较大平皿采样（如14cm）或者通过多个采样平皿采集时灵敏些”。科学家发现学生主动进行采样方式方法数据采集1微米的粒子的收集工作效率比9cm的被动采集的沉降菌方法的效率高2250倍。对于A级区层流环境的微生物采样，建议企业采用中国更加具有灵敏的采样技术方法。沉降菌等采样教学方法就是对于发展相对微生物负载量较高的非无菌工艺的C，D级环境，可以自己作为设计一个重要微生物采样的补充，配合浮游菌采样控制方法不仅可以让我们一起学习使用。对于A，B级环境，浮游菌采样方法能够作为更高效的采样方法选择更适合。浮游菌采样器

3

日常监测中的风险

正如你所知，欧盟无菌生产质量管理规范附录 i 草案于2017年12月24日发布，其中最重要的变化之一是提及微生物和相关生物的数量增加了三倍(原附录增加了23个，新草案增加了68个) ，提及风险的数量增加了近四倍(原附录增加了20个，新草案增加了92个)。因此，我们可以看到监管机构对微生物及风险要求的关注是前所未有的。

　　对于企业日常监测中，新附录9.7条提到A级区的活性粒子（微生物）监测位置应该是无菌生产生活污染进行风险最高的位置，如无菌表面，开口的容器胶塞等。在9.29条提到，活性粒子（微生物）的采样分析方法不应当通过对于中国制药公司生产发展带来任何污染的风险。因此，我们教师可以自己看到监管相关部门的想法，他既认为微生物监测非常具有重要，又认为采用不恰当的采样方法会对社会生产经营环境问题带来一些负面因素影响。

　　之前，很多中小企业由于学生无法找到自己一个合适的微生物方法，担心浮游菌采样方法的平皿频繁更换会对制药环境问题带来污染，因此可以决定不进行积极主动微生物（浮游菌）监测。随着我国现代制药工业经济发展，我们国家已经认识到了社会需要不断提升我们学习对于微生物采样方法的风险评估和风险识别。

　　沉降菌方法研究可能会因为对于社会环境问题造成严重污染，我们需要知道沉降菌表面有大量的营养水分，在10微米至20微米之间，当沉降菌暴露在关键企业生产的A级环境中，这些学生营养水分很可能会被吹到无菌表面，药瓶容器内，药液当中，造成一定污染和交叉污染。浮游菌采样过程中由于不同培养基比较简单容易出现干燥，现代的采样流速系统设计为低流速采样，可以通过尽量的延长浮游菌采样的覆盖公司生产的时间，不要使用频繁模式进行平皿更换。

考虑到A层流环境中气流保护的目的，还应设计等动力采样，保证采样器上方的空气呈现等速采样，不会污染现场。 传统方法将采样器放入A级。 由于采样器内部电路板的电气部分不能彻底灭菌，企业采样VHP或酒精消毒采样器表面不能达到彻底灭菌的效果。

　　WHO无菌工艺成本控制系统要求中建议制药公司企业发展应当采样分体式的微生物采样分析方法，即把采样头和采样器进行有效分离，采样头放入A级并可提前进行研究高温或者其他化学灭菌，而采样器放在B级背景不同环境问题进行实际操作。这样我们可以规避采样器无法得到彻底灭菌对于A级区的影响。现在的浮游菌采样器的内置软件可设置三级权限，可对所有的采样过程需要进行数据监控，并生成具有不可更改的监测记录，方便学生进行追踪。而沉降菌的采样更依赖于纸质记录经济管理，流转中的管理人员风险存在较大。

4

总结

总之，效率验证浮游取样方法比沉降取样方法更有效，适用于临界、低负荷、无菌生产环境。沉降细菌采样法可作为生产过程中浮游细菌采样的补充方法，可用于生物负荷相对较高、非临界的无菌环境，应避免因放置不当或操作不当而造成污染的风险。无论采用何种方法，采样地点、采样频率、采样覆盖时间和采样流量都应根据生产过程的风险评估来确定。

　　沉降菌和浮游菌作为一个制药企业生产发展过程中的监测研究方法，我们国家应当基于财务风险进行评估来选择和考虑采用哪一种方法。现代的无菌制药控制系统对于一些关键区微生物采样更倾向于主动采样方式（浮游菌），而不是低灵敏度的被动采样方法（沉降菌），需要更加重视采样方法可以对于社会生产生活环境的影响，提高无菌工艺控制水平和基于市场风险评估的科学教学方法。